大鼠腎系膜細(xì)胞是從出生2天大鼠的腎臟組織中分離得到的,純化后凍存,冰凍運(yùn)輸。每管細(xì)胞密度超過5×10^5/ml。該細(xì)胞可通過纖連蛋白、Thy-1和平滑肌肌動蛋白特異性抗體的免疫熒光進(jìn)行鑒定。本細(xì)胞經(jīng)檢測不含支原體、細(xì)菌、酵母菌和真菌。如采用ScienCell實驗室特制的培養(yǎng)基,可保證此細(xì)胞5倍增殖。
(a)含雙抗預(yù)冷PBS灌洗腎臟;(b)分離腎皮質(zhì),剪碎并于重疊篩網(wǎng)上進(jìn)行研磨,收集篩網(wǎng)上的組織塊,清洗數(shù)次;(c)混合酶消化,篩網(wǎng)過濾,收集濾液離心;(d)完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀,接種于處理后的培養(yǎng)瓶中;(e)培養(yǎng)數(shù)天后更換混合完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng);(f)細(xì)胞免疫熒光鑒定分離的腎小球系膜細(xì)胞;