熒光定量PCR冰點促銷

          熒光定量PCR檢測

實時熒光定量PCR技術即是在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR避免了傳統(tǒng)PCR以終產(chǎn)物檢測定量產(chǎn)生的偏差，提高實驗的重復性。該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化、比較不同組織的mRNA表達差異、驗證基因芯片和siRNA干擾的實驗結果。 

英拜為您提供的實時熒光定量PCR技術服務，全部實驗皆使用進口試劑完成；主要實驗步驟如下：

1. 設計并合成Realtime PCR引物。

2. 引物溶解后使用Promega的TaqDNA聚合酶進行含SG（SYBR? Green）的PCR反應的優(yōu)化。

3. 客戶樣品RNA抽提

4. RNA質(zhì)量檢測
   a． 紫外吸收測定法測定RNA在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，以計算其濃度并評估RNA純度。
   b． 使用甲醛電泳試劑（ambion）進行變性瓊脂糖凝膠電泳，檢測RNA純度及完整性。

5. 按照逆轉錄酶（Invitrogen或Promega）使用說明將樣品RNA逆轉錄為cDNA。

6. 制備標準曲線樣品：進行相對定量，需要先將樣品的目的基因以及管家基因進行PCR擴增，其產(chǎn)物進行梯度稀釋用于做標準曲線。

7. 標準曲線樣品和待測樣品分別加入到含SG的RealTime PCR反應液中（其中TaqBeadTM 熱啟動聚合酶來自Promega公司），進行RealTime PCR擴增和檢測。

8. 檢測結果進行標準曲線分析，以對待測樣品的目的基因進行定量。相對定量實驗需要進一步用樣品的目的基因測得值除以管家基因測得值以校正誤差，所得結果代表某樣品的目的基因相對含量。

9. 提供實驗報告，包括詳細的實驗方法及實時熒光定量PCR實驗結果及相關圖表。

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高通量測序：人全基因組重測序、外顯子測序、宏基因組測序、RNA-seq、miRNA-seq、lncRNA-seq、單細胞測序、CHIP-seq；
DNA水平：SNP檢測、甲基化檢測、CHIP；
RNA水平：、功能分類 PCR芯片、表達譜基因芯片、實時熒光定量PCR、原位雜交；
蛋白水平：WB、抗體芯片、免疫組化、免疫熒光；報告基因?qū)嶒?br/>細胞實驗：細胞培養(yǎng)及轉染、干擾及過表達、細胞增殖、細胞周期、細胞凋亡、細胞遷移、細胞侵襲；
生物信息學：芯片數(shù)據(jù)分析、高通量測序分析、 個化分析方案；
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