簡介: | circRNA(環(huán)狀RNA)熒光定量PCR |
提供商: | 上海英拜 |
服務(wù)名稱: | 熒光定量PCR |
地區(qū): | 上海 |
circRNA熒光定量PCR實驗 circRNA 是通過特殊的選擇性剪切產(chǎn)生封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)的非編碼RNA。 circRNA不受RNA外切酶的影響,比線性RNA表達更穩(wěn)定。研究表明,某些特殊的 circRNA 分子富含 miRNA結(jié)合位點,在細(xì)胞中起到miRNA sponges的作用,進而解除 miRNA 對其靶基因的抑制作用。ciRS-7(CDR1a)包含 63 個保守的 miR-7結(jié)合位點,該 circRNA 在細(xì)胞中能夠有效吸附miR-7。而miR-7 作為關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子廣泛參與癌癥途徑,如抑制在乳腺癌、膠質(zhì)瘤等癌癥中表達顯著上調(diào)的Pak1的表達;miR-7 也能通過結(jié)合α-synuclein抑制其表達。這些研究暗示ciRS-7 通過ceRNA 機制調(diào)節(jié)miR-7的功能,是神經(jīng)系統(tǒng)疾病和癌癥治療的潛在靶點。圖1 circRNA轉(zhuǎn)錄過程 2 圖2 ciRs-7作用機制 由于circRNA特殊結(jié)構(gòu)及其表達豐度低的原因,circRNA定量PCR實驗還存在一定困難。本公司經(jīng)過特殊的引物設(shè)計、反轉(zhuǎn)錄過程及PCR擴增過程的實驗條件優(yōu)化,能夠高效定量檢測circRNA的表達。CircRNA定量PCR實驗流程如下: 1、樣品RNA抽提 2、RNA質(zhì)檢 3、RNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA 4、circRNA特殊引物設(shè)計及其調(diào)試 圖3 circRNA divergent 引物設(shè)計 5、circRNA PCR擴增6、PCR數(shù)據(jù)統(tǒng)計 只要您提供樣本及待檢測的circRNA名稱,本公司可為您完成后續(xù)的所有實驗。 |