流式檢測細胞凋亡

在現(xiàn)在的科研研究中，最初的研究基本上就是高通量篩選對照組和實驗組的差異表達基因，然后進行大樣本的熒光定量PCR驗證，確定差異基因與某種疾病的相關性。在之后的研究中，我們就要針對差異基因進行干擾或過表達來進行細胞功能實驗。其中通過流式細胞進行細胞凋亡的檢測是比較重要的方法。
一、服務介紹

流式細胞術（FlowCytometry，F(xiàn)CM）：

流式細胞術（FlowCytometry，F(xiàn)CM）：

   就是對在高速流動的鞘液包裹下的細胞、粒子進行分析和分選的技術，這種細胞或粒子是經過特異熒光標記的。其特點是測量速度快，每秒鐘能測數(shù)千個乃至上萬個細胞，且可進行多參數(shù)測量，另一特點是在分析的同時可把具有指定特征的細胞分離出來，這就是分選技術。

   重要參數(shù)：前向角散射（FSC）：前向角散射光的強度與細胞的大小有關，也就是說，同一個細胞群體，F(xiàn)SC強的，其細胞大一些，而FSC弱的，其細胞小一些。側向角散射（SSC）：側向角散射又稱90°散射或大角散射。側向角散射光對細胞膜、胞質、核膜的折射率更為敏感，對胞內較大的顆粒也會有反應。所以，側向角散射光的強弱可反應細胞內精細結構和顆粒的性質。熒光信號（FL）：是細胞或細胞上的熒光染料被激光激發(fā)后發(fā)射出的熒光，不同的熒光染料其發(fā)射波長不同。通過熒光強度可將同一個細胞群體中的有熒光標記的細胞與無熒光標記的細胞區(qū)分開來，也就是我們通常所說的陽性細胞，也可以將陽性細胞中的高FL的細胞與低FL的細胞區(qū)分開來，也就是可以把強陽性細胞和弱陽性細胞區(qū)分開來。一般的流式細胞儀只裝有一個激光光源（488nm），可測出三個FL，即FL1、FL2、FL3。FL2-W指檢測熒光的脈沖寬度，區(qū)分單個細胞和雙聯(lián)體細胞FL2-H指脈沖高度，細胞單位面積上的熒光濃度FL2-A指脈沖面積，即細胞熒光總和。

二、服務流程

1、細胞培養(yǎng)
2、藥物處理
3、試劑處理
4、測定吸光度
5、撰寫實驗報告
三、客戶提供
1、培養(yǎng)好的細胞（大于107）以及所需藥品。
2、藥物作用方式（藥物濃度、時間等）。
四、交付內容
實驗報告：詳細操作步驟、統(tǒng)計分析。