巨噬細(xì)胞來源的外泌體中miRNA的轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)胰腺癌產(chǎn)生耐藥性

吉西他濱是首個用以治療胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）的藥物，其主要通過終止DNA復(fù)制來抑制細(xì)胞生長而發(fā)揮作用。PDAC以其對吉西他濱的耐藥性而聞名。近來，腫瘤相關(guān)的巨噬細(xì)胞（TAM）被證明與吉西他濱的抗藥性有關(guān)。然而，這一過程的確切機(jī)制仍不清楚。利用PDAC小鼠模型和電子顯微鏡分析，作者發(fā)現(xiàn)TAM分泌90nm大小的小泡，這些小泡被癌細(xì)胞選擇性地內(nèi)化，從而使TAM與腫瘤微環(huán)境發(fā)生聯(lián)系。將人工dsDNA片段轉(zhuǎn)染到小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，并對小鼠進(jìn)行注射使其產(chǎn)生PDAC，結(jié)果顯示原發(fā)性腫瘤和肝轉(zhuǎn)移腫瘤組織中dsDNA片段濃度比正常組織相比高4倍。這些巨噬細(xì)胞來源的外泌體（MDE）顯著降低PDAC細(xì)胞對吉西他濱的敏感性。這種效應(yīng)是由MDE中miR-365的轉(zhuǎn)移所介導(dǎo)的。miR-365通過上調(diào)三磷酸鹽和誘導(dǎo)胞嘧啶核苷酶脫氨霉而降低吉西他濱的激活。TAM中miR-365的轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)PDAC小鼠對吉西他濱的抗藥性， 當(dāng)使用miR-365拮抗劑則恢復(fù)對吉他西濱的敏感性。缺乏外泌體分泌能力的Rab27 a/b缺陷小鼠對吉西他濱的反應(yīng)顯著好于野生型小鼠。這些結(jié)果表明MDE是PDAC中吉西他濱耐藥性的關(guān)鍵調(diào)控因子，阻斷miR-365可以增強(qiáng)吉西他濱對癌細(xì)胞的作用。

技術(shù)路線

研究結(jié)果

圖1 巨噬細(xì)胞來源的外泌體（MDE）的鑒定及其對細(xì)胞耐吉西他濱（GEM）的影響。

圖2 巨噬細(xì)胞來源的外泌體（MDE）的分離。

圖3 外泌體中miR-365的轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)吉西他濱耐藥性。

圖4 巨噬細(xì)胞來源的外泌體（MDE）和miR-365調(diào)節(jié)嘧啶合成和CDA表達(dá)。

圖5 巨噬細(xì)胞來源的外泌體和在體內(nèi)的吉西他濱耐藥性。

圖6 miR-365拮抗劑挽救實(shí)驗(yàn)。

圖7 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)吉西他濱耐藥的機(jī)制圖

參考文獻(xiàn)：Binenbaum, Y., et al., Transfer of miRNA in macrophages-derived exosomes induces drug resistance of pancreatic adenocarcinoma. Cancer Res, 2018. (IF=9.130)